果蔬對(duì)促進(jìn)人類營(yíng)養(yǎng)均衡起著至關(guān)重要的作用。隨著我國(guó)人民生活水平的提高及營(yíng)養(yǎng)知識(shí)的普及，果蔬消費(fèi)量大幅增加。果蔬在采后貯運(yùn)階段易因病原菌侵染而產(chǎn)生病害，造成腐爛變質(zhì)。傳統(tǒng)上通過使用化學(xué)殺菌劑防治果蔬采后病害，但殺菌劑的殘留易對(duì)消費(fèi)者健康造成危害。為了保障果蔬的食用安全性，利用拮抗微生物對(duì)果蔬采后病害進(jìn)行生物防治的方法成為研究的熱點(diǎn)。

中食智庫專家、江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院副院長(zhǎng)張紅印表示，目前，我國(guó)在拮抗微生物的篩選、生物防治的機(jī)制、提高生物防治效力以及拮抗微生物制劑化方面均取得了較大進(jìn)展，加快果蔬采后病害生物防治的商業(yè)化進(jìn)程，對(duì)于助力我國(guó)果蔬產(chǎn)業(yè)的快速、健康發(fā)展和鄉(xiāng)村振興具有重要意義。

果蔬采后病害及其危害

作為人們?nèi)粘ｏ嬍持斜夭豢缮俚囊活愂澄�，果蔬可以提供其他類食物所缺乏或含量較少的維生素、礦物質(zhì)和生物活性成分等營(yíng)養(yǎng)健康成分。大多數(shù)果蔬的種植具有地域性和季節(jié)性的特點(diǎn)。隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們對(duì)果蔬的需求量越來越大，對(duì)果蔬品種的需求也不再局限于當(dāng)?shù)靥禺a(chǎn)，果蔬的供應(yīng)期也從當(dāng)季供應(yīng)變成全年供應(yīng)。目前，我國(guó)果蔬種植面積和產(chǎn)量位居世界首位。

果蔬具有脆嫩多汁等特性，在采后貯運(yùn)和銷售過程中極易遭受病原菌侵染而產(chǎn)生病害，導(dǎo)致果實(shí)腐爛變質(zhì)，給產(chǎn)業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失，比如蘋果和梨的青霉病和灰霉病，桃、杏、李、櫻桃的灰霉病和軟腐病，柑橘類的綠霉病和青霉病，葡萄的灰霉病和黑斑病，番茄的灰霉病和黑斑病等。病原真菌侵染不僅會(huì)導(dǎo)致果蔬腐爛變質(zhì)，更重要的是很多病原真菌會(huì)產(chǎn)生有毒的次生代謝產(chǎn)物——真菌毒素，從而污染果蔬及其加工品（果汁、果酒等），對(duì)消費(fèi)者健康造成危害，比如擴(kuò)展青霉侵染蘋果產(chǎn)生展青霉素（又稱棒曲霉素）、炭黑曲霉侵染葡萄產(chǎn)生赭曲霉毒素A（OTA）等。因此，必須采取有效、安全的措施防治果蔬采后病害。

果蔬采后病害的傳統(tǒng)防治方法

傳統(tǒng)的防治果蔬采后病害的方法包括物理法和化學(xué)法。物理方法主要是通過低溫貯藏、熱處理、氣調(diào)貯藏、臭氧處理等方式，抑制病原微生物的活性或直接殺死病原微生物。低溫貯藏是果蔬采后保鮮最常見的物理手段，但是低溫貯藏對(duì)設(shè)備要求高，能耗大，間接地提高了控制果蔬采后病害的成本。熱處理可以顯著降低果蔬采后病害的發(fā)病率，但該方法易對(duì)果蔬的感官品質(zhì)產(chǎn)生不良影響，且能源消耗較高。因此，雖然這些方法操作簡(jiǎn)易、效果較好，但在實(shí)際應(yīng)用中卻受到限制。

化學(xué)方法主要是利用傳統(tǒng)的化學(xué)殺菌劑（如仲丁胺、多菌靈、咪唑、甲基托布津等）來抑制或殺死病原微生物，其作用機(jī)理清楚，效價(jià)高，在實(shí)際使用中能顯著降低病原菌侵染造成的果蔬腐爛，降低經(jīng)濟(jì)損失，是控制采后病害常用且有效的傳統(tǒng)方法。然而，對(duì)傳統(tǒng)化學(xué)殺菌劑的過度依賴導(dǎo)致了各種問題的出現(xiàn)，如病原菌耐藥性的產(chǎn)生、對(duì)生態(tài)環(huán)境的破壞，尤其是殺菌劑的殘留對(duì)于食用者健康的危害，越來越受到食品科技工作者及國(guó)家相關(guān)監(jiān)管機(jī)構(gòu)的關(guān)注。

果蔬采后病害的生物防治法

膳食寶塔將食物分為谷物類，果蔬類，畜禽肉、水產(chǎn)品和蛋類，奶及奶制品、大豆、堅(jiān)果類，油、鹽、糖類五大類。因此，果蔬類食品的食用安全性不容小覷。必須尋找可替代化學(xué)殺菌劑的安全、有效的新方法防治果蔬采后病害，以保障老百姓日常食用果蔬的安全性。

生物防治法是利用拮抗微生物通過物種之間的相互作用來抑制病原菌的生長(zhǎng)繁殖，從而控制果蔬采后病害，抑制真菌毒素的產(chǎn)生。生物防治法因具有安全、對(duì)環(huán)境友好和不引起病原菌產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，逐漸成為控制果蔬采后病害研究的熱點(diǎn)，并有望在將來取代化學(xué)殺菌劑的使用。到目前為止，科研人員已分離出數(shù)百種拮抗微生物，包括細(xì)菌、霉菌和酵母菌等。其中，拮抗酵母菌由于抑菌能力強(qiáng)、安全性高、對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求低、生長(zhǎng)繁殖快、對(duì)逆境具有較強(qiáng)的耐受能力，而成為控制果蔬采后病害的常用菌種。拮抗酵母菌對(duì)大多數(shù)化學(xué)殺菌劑不敏感，與某些化學(xué)物質(zhì)（如植酸）結(jié)合使用還能提高其防治效果，也能與其他控制方法相容，目前已廣泛用于葡萄、梨果、蘋果、柑橘、草莓、番茄、蘆筍等多種果蔬采后病害的控制，且已取得了良好的效果。

利用拮抗酵母防治果蔬采后病害的機(jī)制

拮抗酵母菌控制果蔬采后病害的機(jī)制主要包括三個(gè)方面：一、拮抗酵母與病原菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)與空間，從而抑制病原菌生長(zhǎng)。拮抗酵母適應(yīng)性強(qiáng)，繁殖速度快，能夠比病原菌更快地占據(jù)果實(shí)傷口、表面或者表皮氣孔等空間位點(diǎn)并進(jìn)行繁殖，使得病原菌無法獲得足夠的空間和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而抑制果蔬病害的發(fā)生。二、拮抗酵母對(duì)果蔬采后病害病原菌的重寄生作用。電子顯微鏡下能夠清楚地看到拮抗酵母黏附于病原菌菌絲體上，導(dǎo)致菌絲畸形，并且部分菌絲結(jié)構(gòu)遭到破壞，有明顯的凹陷和坍塌。三、誘導(dǎo)提高水果抗病性。與前兩者相比較，這是一種相對(duì)復(fù)雜的作用機(jī)制。拮抗酵母可以通過激活宿主防御反應(yīng)相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、誘導(dǎo)防御反應(yīng)基因和蛋白的表達(dá)；誘導(dǎo)提高水果抗氧化能力；誘導(dǎo)水果產(chǎn)生抗病性物質(zhì)的方式，提高水果的抗病性。

提高拮抗酵母生防效力的方法

雖然已有的研究結(jié)果表明，拮抗酵母菌在防治果蔬采后病害方面具有較好的效果，但與化學(xué)殺菌劑相比，其防治效力仍不夠理想。因此，需要不斷探索提高拮抗酵母對(duì)水果采后病害防治效力的措施。

拮抗酵母與其他方法如物理方法、化學(xué)添加物以及低劑量化學(xué)殺菌劑等結(jié)合使用，可提高其生物防治效力。其中，與物理方法結(jié)合使用較為常見，比如，與臭氧結(jié)合使用，可顯著提高羅倫隱球酵母（Cryptococcus laurentii）對(duì)草莓灰霉病的防治效果；與化學(xué)物質(zhì)結(jié)合使用目前也取得了顯著的效果，比如，茶多酚（TP）與H. uvarum結(jié)合使用可有效減少葡萄灰霉病的發(fā)生。

單一拮抗菌的抗菌譜窄且對(duì)生存環(huán)境依賴性較高，為了提高拮抗菌的生物防治效力，基于復(fù)合拮抗菌的果蔬病害控制研究已成為研究熱點(diǎn)。兩種拮抗酵母羅倫隱球酵母和紅冬孢酵母（Rhodosporidiumpaludigenum）結(jié)合使用對(duì)柑橘采后病害的生防效果要顯著優(yōu)于各自單獨(dú)使用時(shí)的效果；漢遜德巴利酵母（Debaryomyces hansenii）和細(xì)菌嗜根寡養(yǎng)單胞菌（Stenotrophomonas rhizophila）結(jié)合使用也可有效抑制甜瓜果腐病的發(fā)生。附生及內(nèi)生微生物在果蔬防御中可能發(fā)揮著重要作用，因此，利用微生物組學(xué)等技術(shù)手段分析果蔬附生及內(nèi)生菌群落變化，篩選核心微生物，有利于構(gòu)建復(fù)合微生物菌群，以增強(qiáng)其對(duì)果蔬病害控制效率。

拮抗微生物制劑的制備及產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用

對(duì)果蔬病害進(jìn)行生物防治研究的最終目的是將拮抗微生物應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)中，因此拮抗微生物制劑的制備是關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。制劑在制備、運(yùn)輸和保存過程中易受到高溫、干燥、氧化等不良因素的影響，導(dǎo)致活菌數(shù)下降，從而影響其穩(wěn)定性、貨架期及生防效力。這可通過建立高活力拮抗微生物制劑的制備技術(shù)來解決。優(yōu)良的制備技術(shù)不僅能夠提高制劑中拮抗微生物的存活率、增強(qiáng)其穩(wěn)定性，同時(shí)能減少生產(chǎn)成本，對(duì)于加速拮抗微生物在果蔬病害防治中的實(shí)際應(yīng)用非常重要。

微生物制劑可分為液體制劑和固體制劑兩種形式。液體制劑雖然成本相對(duì)較低，但保存期較短，生防效力不穩(wěn)定。海藻糖、半乳糖、脫脂乳粉等作為保護(hù)劑應(yīng)用于液體制劑的制備可顯著提高拮抗微生物的活性及保藏期。固體制劑具有保藏期長(zhǎng)、不易受污染，便于貯藏、運(yùn)輸及質(zhì)量控制等優(yōu)點(diǎn)，其制備常用冷凍干燥法和噴霧干燥法等。冷凍干燥法制備的固體制劑活菌數(shù)高，是目前較為常用的固體制劑制備方法，但該方法干燥時(shí)間長(zhǎng)，且成本較高。噴霧干燥具有干燥迅速、工藝簡(jiǎn)單、可連續(xù)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，所需費(fèi)用比冷凍干燥法低6--10倍，干燥時(shí)間也顯著縮短，通過該方法制備的固體制劑通常能在低溫和常溫下長(zhǎng)時(shí)間保持高活性。

目前，國(guó)外已有部分生防制劑產(chǎn)品投入商業(yè)使用，如Aspire（美國(guó)）、Yeild Plus（南非）、Shemer（以色列）和Candifruit（西班牙）等。我國(guó)對(duì)于果蔬采后病害生物防治的研究起步較晚，目前尚處于推廣試用階段，在實(shí)際生產(chǎn)中還未有大規(guī)模應(yīng)用。因此，果蔬采后病害生物防治的研究和應(yīng)用技術(shù)的開發(fā)尚需要科研工作者們繼續(xù)努力，加快其產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程，助力于我國(guó)果蔬安全的保障，服務(wù)于國(guó)家大健康戰(zhàn)略。